實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%的酒精擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。
小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)(至少ClassII)。操作過(guò)程中,應(yīng)避免引起氣溶膠類物質(zhì)的產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。接種針每次使用前后,必須通過(guò)火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%的酒精擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣的非無(wú)菌區(qū)域操作。使用無(wú)菌瓶?jī)?nèi)的溶液是,不可將無(wú)菌敷料堵塞瓶口傾倒無(wú)菌溶液,或直接伸入溶液瓶?jī)?nèi)蘸取,以免污染剩余的溶液。每次操作過(guò)程中,均應(yīng)做陰性對(duì)照,以檢查無(wú)菌操作的可靠性。如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3%的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
無(wú)菌包內(nèi)物品不慎污染或無(wú)菌包浸濕,外界微生物可滲入包內(nèi),造成污染,需重新消毒。凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水龍頭下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。吸取菌液時(shí),必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時(shí)后取出沖洗。
戴手套時(shí)應(yīng)注意未戴手套的手不可觸及手套外面,而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發(fā)現(xiàn)破裂,應(yīng)立即更換。脫手套時(shí),須將手套口翻轉(zhuǎn)膠下,不可用力強(qiáng)拉手套邊緣或手指部分,以免損壞。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%的酒精擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后。
總的來(lái)說(shuō),實(shí)驗(yàn)室裝修不是普通的工裝裝修,有自己特定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范,無(wú)菌室設(shè)計(jì)裝修有很多細(xì)節(jié)需要注意,在裝修中必須綜合考慮實(shí)驗(yàn)室整體規(guī)劃合理布局。當(dāng)前無(wú)菌室多存在于微生物工廠,一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過(guò)電動(dòng)裝置使空氣通過(guò)過(guò)濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面,使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無(wú)菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。隨著實(shí)驗(yàn)室裝修水平的提高,實(shí)驗(yàn)室工作人員對(duì)設(shè)計(jì)的要求越來(lái)越高,